淋巴细胞培养基

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淋巴细胞培养基

【产品名称】 
 通用名称: 淋巴细胞培养基
 英文名称: Lymphocyte Medium

【包装规格】 5ml/瓶,24瓶/盒
【预期用途】 本产品为细胞标本前处理试剂,用于淋巴细胞增殖培养,培养后的淋巴细胞用于体外诊断,该产品不用于治疗性用途。
【主要成分】 RPMI1640、PHA、肝素、小牛血清等
【储存条件及有效期】 保质期8个月。(-20℃)冷冻保存,可稳定至保存期末。
【使用方法】
1.采血: 用10:2肝素(10%)温润无菌注射器抽取外周血2ml(注意:消毒时需脱碘)

2.种血: 将注射器搓捏,使血样混匀,在无菌条件下,用7#针头垂直种血(外周血28-32滴,脐带血22-24滴)至淋巴细胞培养基内。

3.培养: 将培养瓶放入37℃恒温箱中培养68-72小时,培养期间注意观察培养基有无凝血、溶血或长菌的现象,可每天将培养基摇一摇,以便细胞可获得充分的营养,一般情况下可不摇。

4.制片:
  加秋水仙素:在培养完成前2-3小时,加入浓度为20ug/ml的秋水仙素2-3小滴(7#针头竖滴)后,继续培养2-3小时。
离心:将培养液用吸管吸至离心管中(10ml离心管)2000转/分X10分钟,弃上清,留沉淀。
低渗:加入已预温至37℃的0.075mol/L氯化钾溶液约8ml,用吸管充分打匀,放入37℃水浴箱中,温育30分钟。
预固定:向离心管中加入现配的预温至37℃的甲醇、冰醋酸固定液(3:1)1ml左右,轻轻混匀,置室温下5分钟,2000转/分X10分钟,弃上清,留沉淀。
固定:沿管壁缓慢加入现配的预温至37℃的新配固定液约8ml轻轻混匀,然后2000转/分离心10分钟。加入固定液再次固定。弃上清,用固定液将沉淀调成细胞悬液(不宜太浓,一般加固定液至0.5ml)在冰片上滴片,每张片上滴2滴。
烤片:立即放入75℃烤箱中烤片3小时。

5.显带:先将玻片放在预温至37℃的0.25%胰酶溶液中(PH=7.2-7.4)消化1分左右,每次作用时间并不完全相同。可先试一张片子,再根据显带效果调整胰酶作用时间,再放在预温至37℃的0.85%NACl溶液中漂洗两次,在预温至37℃的吉姆萨染液中染色10分钟,自来水冲洗干净,用吹风机吹干,即可阅片。

【注意事项】
1:采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝,如需保存标本,应加肝素抗凝。
2:采集的外周血在冰箱4℃保存,保存期不能超过一周。

 公司对产品进行重新注册,包装全新改版,包装尺寸变小,减小保存空间,利于存放。
 产品名由“淋巴细胞培养液”变更为“淋巴细胞培养基”(粤穂械备20150158号)