骨髓细胞培养基

【产品名称】

通用名称：骨髓细胞培养基

商品名称：骨髓细胞培养基

英文名称：Bone marrow Medium

【包装规格】

5ml/瓶，24瓶/盒

【预期用途】

本产品为细胞标本前处理试剂，用于骨髓细胞增殖培养，不具备对细胞的选择、诱导、分化功能，培养后的骨髓细胞用于体外诊断，该产品不用于治疗性用途。

【主要组成成分】

RPMI1640、青霉素、链霉素、小牛血清等。

【储存条件及有效期】

    4-8℃保存, 有效期1个月； -5℃以下保存, 有效期12个月，可稳定至保质期末。

【使用方法】

一、标本接种

1、采集标本

无菌抽取3-5ml骨髓，注入肝素钠抗凝管，使抗凝剂与标本充分混匀，防止凝固。

2、标本处理

① 在无菌操作台里，取2ml骨髓入无菌离心管中，加入RPMI-1640液5ml洗脱。

② 1500转离心10分钟，去上清。再加入RPMI-1640液5ml，混匀。

③ 重复洗脱共三次，最后一次去上清，加入RPMI-1640液至洗脱前体积，混匀。

3、接种

用注射器抽取离心管中的细胞液，参考患者白细胞计数量按梯度用7号针头垂直滴细胞液至骨髓细胞培养基内（约为8滴、12滴、15滴）

二、培养

置37℃±0.5℃恒温箱中培养约48小时（可在中间时段轻摇一次，使细胞获得充分营养）。

三、细胞学处理

1、培养完成前45分钟，加入秋水仙素（20ug/ml）至终浓度为0.2-0.8ug/ml，继续培养45分钟。

2、将细胞液吸入10ml离心管中，1500转离心10分钟。去上清，留约0.5ml细胞液。

3、低渗：加入0.075M KCl 8ml，用吸管吹打约30次，37℃水浴30分钟。

4、预固定：加入1.5ml左右的固定剂（甲醇∶冰醋酸=3∶1），轻混匀。37℃水浴10分钟。1500转，离心10分钟，去上清，约留0.5ml上清液。

5、固定：加入8ml左右的固定剂，轻混匀。1500转，离心10分钟后去上清，约留0.5ml上清液。

6、重复固定：加入8ml左右的固定剂，轻混匀，1500转，离心10分钟，去上清，约留0.5ml上清液。去上清液时，视管底细胞量加入适当固定液，轻轻混匀制成细胞悬液。

7、滴片：将细胞悬液滴于用冰水预冷的载玻片上，高度约为30cm±，每张载玻片上滴2滴。

8、放入75℃烤箱中烤片3小时。

四、染色体显带

将经烤片处理的玻片放入37℃的0.25%胰酶溶液中（PH=7.2-7.4）消化1分至1分半钟（根据显带效果调整胰酶作用时间）再用0.85%NaCl溶液（预温至37℃）漂洗两次，在预温至37℃的Giemsa溶液中染色，自来水冲洗干净，晾干后，即可阅片。

【检验结果】细胞形态好，分裂细胞多，细胞核型大，染色体清晰。

【检验方法的局限性】无
【产品性能指标】参考骨髓细胞培养基临床免疫检验各项目质量控制指标。
【注意事项】

1. 细胞密度以3×106/ml左右为宜；

2.当遇到已经过多次放疗、化疗和药物治疗的病人，重复两次标本都缺乏有丝分裂相，可能是病人本身原因造成的。

3.实验操作的温度最好控制在26℃以上，湿度保持在70%左右为最佳。

4.短期内可放4-8℃保存，若长期储存，应放-5℃以下保存，不可反复冻融。

5. 远距离运送的标本必须在24h内投入培养；

6.本产品只用于体外诊断，操作过程应避免污染；操作人员在检验时应做好防护，预防疾病传播。

我公司生产的骨髓培养基为目前国内唯一获得市场准入资质的产品。
产品备案号：粤穂械备 20150166